如何选择合适的细胞核蛋白内参抗体？

 增殖细胞核抗原（Proliferating Cell Nuclear Antigen简称PCNA）由Miyachi等于1978年在 SLE（系统性红斑狼疮）患者的血清中首次发现并命名，因其只存在于正常增殖细胞及肿瘤细胞内而得名。PCNA是一种分子量为36KD的蛋白质，在细胞核内合成，并存在于细胞核内，为DNA聚合酶的辅助蛋白。由于其在细胞核内稳定表达，因此其抗体被广泛应用于细胞核蛋白的内参抗体。

核内参PCNA抗体-用于细胞核蛋白WB实验内参的PCNA单克隆抗体

常用的细胞总蛋白质内参有GAPDH和细胞骨架蛋白β-Actin或β-Tubulin等。对于一些植物的样本，则需要特别的植物Actin蛋白作为内参。当实验样品中只是核蛋白，而不是细胞总蛋白提取液时，可以用组蛋白H（Histone H），或者增殖细胞核抗原（PCNA）等为核内参抗体。除了这些，其它常见的核蛋白内参还有K70, K80, Lamin A和B，在一些文献报道中，Erk2、TATA binding protein（TBP）以及c-Jun、c-Fos等都有使用。但是需要注意的问题是核蛋白内参的选择需要考虑实际的实验环境，比如在涉及细胞增殖相关试验中，c-Jun由于自身表达变化就不适合做内参；而在凋亡实验时，TBP、Lamin等也不适合作为内参。

另外，我们还需要根据目的蛋白的大小选择合适的核内参，我们推荐内参要与检测的目的蛋白的分 子量最好相差5kD以上，因此你需要根据你目的蛋白的分子量来选择合适的内参。PCNA的检测分子量大约在28kD，而Histone H3的检测条带大约在18kD，因此PCNA比较适合用于检测目标蛋白在较大的WB实验，而Histone H3则不适合用于13kD-23kD大小的目的蛋白内参。另外，虽然PCNA是最合适的核内参抗体之一，但是在某些条件下，一些影响增殖的因素会导致样品间PCNA含量的变化，就不适合作为内参。

另外，我们还需要考虑自己的需要，特别是实验应用上的需要。一般来说，应用类型越多，在使用过程中的选择余地就越大，而小鼠源的单克隆抗体一般在特异性、稳定性以及效价都要优于多克隆抗体。 另外，抗体的效价也是考察该抗体性价比的重要方面，也即相当于实际应用时的稀释比率。一个效价高的100μl PCNA抗体（假如其WB检测的稀释比率是1:5000，最终使用液相当于500ml），要比效价低的1ml的PCNA抗体（假如WB检测的稀释比率是 1:200，最终使用液相当于2ml）性价比更高。因此在选择抗体的时候，不但需要考虑抗体的量，还需要考虑抗体的效价，即不同应用的建议稀释比率。

为什么选择推荐Engibody品牌的PCNA抗体？

供应PCNA抗体的品牌是比较多的，象Abcam、Santa Cruz、Cell Signaling、Sigma，甚至于Millipore、R&D、Novus、BD等都有相应的产品。下面是几个进口品牌的简单比较：

品牌	货号	2016年报价	规格	应用类型
	ab29	￥4476	100μg	WB, IP, IHC
	2586S	￥3100	100μl	WB, IF, IHC, FC
	SAB2502099	￥4299	100μg	WB, ELISA
	AT0016	￥1998	100μl	WB, IHC

另外，一些国内的供货商也能提供分装的PCNA抗体，分装的PCNA抗体在质量稳定性上非常不可靠，并且经过分装以后，其效价也有损失。而国内生产的PCNA抗体有些虽具有较好的活性，但国内生产的抗体大多为多克隆抗体，在批次之间的稳定性上较难控制。

如果您想买到一支性价比更高，同时也是原装进口品牌的PCNA核内参抗体，那engibody可能会是您的一个重要考虑选项之一。

产品名称及描述	品牌	货号	产品说明
Anti-PCNA Mouse Monoclonal Antibody	engibody	AT0016

该抗体单克隆抗体的抗原为人PCNA蛋白中兼具特异性和保守性的一段序列，可用于小鼠、人以及大鼠样本的WB内参。另外，该抗体的效价非常高，WB实验推荐稀释比率为1:1000-1:10,000。

该PCNA内参抗体免疫组织化学的效果也很不错，是一款非常适合做免疫组化对细胞骨架进行染色定位的抗体产品。另外，也有客户报告使用该抗体用于组织的荧光染色，也取得了意外的效果。