技术服务价目表---------专注于免疫学五大实验，专注才能专业！

项目名称	单价	说明	交付	项目周期
WB免疫印迹	125/样本/指标	客户提供细胞或组织样品	实验报告、原始图片、实验protocol	10个工项目
IP免疫沉淀	询价	客户提供细胞或组织样品	实验报告、原始图片、实验protocol	10个工作日
Co-IP免疫共沉淀	询价	客户提供细胞或组织样品	实验报告、原始图片、实验protocol	20个工作日
ChIP染色质免疫共沉淀	询价	客户提供细胞或组织样品	实验报告、原始图片、实验protocol	30个工作日
IHC免疫组化	50/切片/样本	客户提供组织样品或石蜡切片	实验报告、原始图片、实验protocol	10个工作日

• 免疫学实验原理简介

• 一、蛋白印迹WB

  Western blotting (WB)是在蛋白质凝胶电泳和固相免疫测定基础上发展起来的蛋白质检测技术，是将SDS-PAGE电泳分离的非标记蛋白质转移到固相载体（NC膜，PVDF膜），再用抗血清或单抗对蛋白质进行鉴定及定量的分析技术，其检测蛋白质的灵敏度为ng级，该技术广泛应用于医学、生物学研究领域。

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• 步骤一：检测样本的准备（组织、细胞、血清、渗出液等），选择合适的WB抗体。

  步骤二：蛋白质样本制备，根据实验要求选择制备总蛋白、膜蛋白、浆蛋白或核蛋白。

  步骤三：SDS-PAGE凝胶电泳分离蛋白，将分离的蛋白转移到固相支持载体（NC膜，PVDF膜）。

  步骤四：目标蛋白的免疫学检测，化学发光显示蛋白。

  步骤五：条带的定量分析，测定光密度值IOD。

• 二、免疫组化IHC

• 简介：
  免疫组织化学又称免疫细胞化学，是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来，借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用，在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物质(如蛋白质、多肽、酶、激素、病原体以及受体等)。

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  客户提供：
  1、样本、一抗、阴性、阳性对照或相关文献资料。（一抗可由维景代购）；
  2、样品要求：
  (1)石蜡切片：组织样本需取自新鲜，并立即放入固定液，避免干燥。 细胞浓度不低于1*10^8。
  (2)冰冻切片：离体组织应尽快取材， 细胞浓度不低于1*10^8，液氮保存。
  (3)细胞爬片：冷丙酮固定，－20℃保存。
  (4)细胞涂片：常用乙醇、冷丙酮和多聚甲醛固定。
  

  维景提供：
  1、实验报告；
  2、实验组和阴性、阳性对照切片，各实验组的数码照片。

三、免疫沉淀IP

免疫沉淀是利用抗体特异性反应纯化富集目的蛋白的一种方法。抗体与细胞裂解液或表达上清中相应的蛋白结合后，再与蛋白A/G（ProteinA/G）或二抗偶联的agaose或Sepharose珠子孵育，通过离心得到珠子-蛋白A/G或二抗-抗体-目的蛋白复合物，沉淀经过洗涤后，重悬于电泳上样缓冲液，煮沸5-10min，在高温及还原剂的作用下，抗原与抗体解离，离心收集上清，上清中包括抗体、目的蛋白和少量的杂蛋白。

四、免疫共沉淀Co-IP

免疫共沉淀（Co- Immunoprecipitation, Co-IP）是利用抗原和抗体的特异性结合以及细菌的Protein A或G特异性地结合到免疫球蛋白的Fc片段的现象开发出来的方法。其基本原理是，在细胞裂解液中加入抗兴趣蛋白的抗体，孵育后再加入与抗体特异结合的结合于Agarose珠上的Protein A或G，若细胞中有与兴趣蛋白结合的目的蛋白，就可以形成这样一种复合物：“目的蛋白—兴趣蛋白—抗兴趣蛋白抗体—Protein A或G”，经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，复合物又被分开。然后经免疫印迹或质谱检测目的蛋白。这种方法得到的目的蛋白是在细胞内与兴趣蛋白天然结合的，符合体内实际情况，得到的结果可信度高。这种方法常用于测定两种目标蛋白质是否在体内结合；也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。

目前多用预先结合了protein A/G的sepharose。免疫沉淀实验用途非常广泛，而且基于最基本的免疫沉淀实验衍生出了许多免疫沉淀相关实验手段(比如免疫共沉淀、染色质免疫沉淀和RNA-蛋白免疫沉淀)。因此，免疫沉淀实验的后续检测方法要视实验目的而定。